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Waters色譜柱開啟和安裝的步驟
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更新時(shí)間：2020-11-30
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色譜柱開啟和安裝的推薦步驟：
使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統(tǒng)，確保系統(tǒng)干凈，不含任何緩沖鹽和污染物。
取用色譜柱時(shí)避免磕碰掉落。
將色譜柱入口端連接到系統(tǒng)上，柱出口端先不要連接，色譜柱身上有箭頭標(biāo)明正確流向。
在0.1 mL/min流速條件下用純乙腈潤(rùn)洗色譜柱，然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5 mL/min。
當(dāng)溶劑均勻的從柱出口端流出，停流速，將色譜柱出口端接到系統(tǒng)檢測(cè)器上（這樣可以避免氣泡進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng)，并且可快速達(dá)到基線平衡）。
重啟流速，按照步驟4的方法逐漸提高流速，至常規(guī)分析時(shí)所使用的流速。
參考柱效測(cè)試報(bào)告中的方法，使用該流動(dòng)相條件平衡色譜柱，通常需要使用5-10倍柱體積的流動(dòng)相，直至壓力與基線穩(wěn)定。
測(cè)試柱效。如果沒有柱效測(cè)試報(bào)告中的分析物，請(qǐng)聯(lián)系沃特世化學(xué)消耗品部門尋求支持，使用合適的濃度與進(jìn)樣量。柱效結(jié)果略低于柱效測(cè)試報(bào)告屬正常情況。如結(jié)果明顯偏低、峰形拖尾，提示色譜柱和/或所使用的液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài)，需要進(jìn)行故障排查。
當(dāng)使用2.1 mm內(nèi)徑色譜柱時(shí)，建議優(yōu)化系統(tǒng)以減少譜帶展寬，包括：使用檢測(cè)器微量流通池，減少進(jìn)樣器loop環(huán)體積，使用較小內(nèi)徑（如0.005''或0.12 mm）的系統(tǒng)管路。并確保管路與色譜柱連接恰當(dāng)、無(wú)死體積。
當(dāng)使用小顆粒填料（如2.5 um）短柱進(jìn)行高效快速分離時(shí)，需要考慮以下因素：
確保管路與色譜柱連接恰當(dāng)、無(wú)死體積，盡量?jī)?yōu)化系統(tǒng)減少譜帶展寬；
提高采樣頻率至10點(diǎn)/秒以上；
較小粒徑的色譜柱產(chǎn)生的柱壓較高，而較小粒徑要達(dá)到優(yōu)色譜效率所需的線速度較高，請(qǐng)根據(jù)所用LC系統(tǒng)的實(shí)際情況調(diào)節(jié)流速；
可使用較高的柱溫來補(bǔ)償小顆粒造成的壓力升高，例如40°C。使用雜化顆粒反相色譜柱時(shí)，可使用45°C或更高。